年版《中国药典》,正式将薄层色谱法(TLC法)用于中药质量控制,结束了中药除了依赖外观形态经验鉴别,而再无其他检测方法的历史;在年版《中国药典》中,TLC法设置了对照品药材,通过色谱比较,既体现了样本成分的专属性,又体现了整体性,较单一化学对照品鉴别更具有可控性,所以我们利用TLC法的专属性和整体性对被检样本进行定性检测。
上图中1号、4号、5号和6号样本在与对照药材S1(黄芪原药材)及对照品S2(黄芪甲苷)相应位置显相同颜色主斑点,可以定性为黄芪提取物。2号、3号色谱条带中无S2主斑点并且与原药材S1色谱条带整体分布情况也不匹配,定性为非黄芪提取物样本。据此可判断,在品质方面,(1=4=5=6)>2、3。
TLC法解决了中药定性检测的问题,那么又应该如何去检测具体的成分与含量呢?例如下图,1号、3号、4号都是市面上的黄芪提取物,到底含有哪些有效成分?指标成分如何量化呢?
在年版《中国药典》中,除了有TLC法之外,还首次使用了高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和薄层扫描法(TLCS)等现代检测手段测定中药活性成分或指标成分含量,这也是巨大的技术进步。再到年版《中国药典》,在量化指标方面,也逐步由测定指标性成分过渡到测定活性成分、由测定单一成分过渡到测定多种成分,使得评价方式更全面。
在多种定量检测方法中,如何针对特定植物提取物选择最为合适的方法,也需要根据其成分及特点进行分析比较。如黄芪提取物,由于黄芪甲苷仅在紫外末端有吸收,而蒸发光检测器(ELSD)对在紫外末端吸收的成分检测具有明显的优势,故针对此次盲样黄芪提取物选择高效液相色谱法-蒸发光检测器(HPLC-ELSD)对黄芪甲苷进行含量测定。如HPLC-ELSD色谱图显示,1号、4号均可检出黄芪甲苷峰、2号未检出。
接下来再总结黄芪的特点,它含有皂苷类、多糖类、黄酮类、氨基酸和多种微量元素等成分,其中皂苷类、多糖类和黄酮类是黄芪的主要有效成分,黄芪甲苷是黄芪总皂苷的主要活性指标成分之一。所以,在完成以上的定性定量检测后,本次黄芪提取物盲样筛查中,我们还选择了主效成分黄芪甲苷、总多糖、总黄酮等进行含量检测,便于全面比较样品质量的优劣,结果详见下表。
综上所述,除2号、3号外,样本1号、4号、5号、6号虽然都是黄芪提取物,但1号颜色浅,6号含有肉眼可见白色细小颗粒样异物,4号、5号虽说颜色相对较好,各项指标却也不尽相同,那么大家可结合自身使用需求和产品性价比,做出理性选择。
近年来,北京爱绿集团通过走访国内多地多家植物提取物企业,进行提取物产品采样搜集和相关含量测定的调研工作,结果发现植物提取物生产企业多为需方标准和企业标准,多以合同中的质量条款作为产品交付依据,产品质量的检测方法也较为混乱,缺乏公认的产品质量标准。
所以,我司通过借鉴《中国药典》、中医药等领域在TLC鉴别、HPLC指纹图谱/特征图谱及谱效关系的研究经验,制定了大量明确的植物提取物产品标准,用以规范产品,让客户买得放心。
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